作者：韩忠耀, 张涛, 宋义勇, 卢洋, 田浩, 王万乐, 曹芳

作者单位：黔南民族医学高等专科学校，贵州 都匀 558000

关键词：水冬瓜叶;指纹图谱;高效液相色谱法;正交偏最小二乘判别分析

摘要：

建立不同采收期24批次水冬瓜叶药材的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，并采用化学模式识别法对影响不同采收期水冬瓜叶药材的质量标志物进行预测，为不同采收期水冬瓜叶质量控制及质量标志物预测提供方法和依据。采用Agela Promosil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以0.2%（体积分数）磷酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱，流量为1.0 mL/min，柱温为35 ℃，检测波长210 nm，进样量10 μL。建立了不同采收期24批次水冬瓜叶HPLC指纹图谱，除Y19、Y23样本外，其余样本相似度为0.853~0.973。PCA将不同采收期24批次水冬瓜叶聚成3类。依据VIP>1，预测了影响不同采收期24批次水冬瓜叶药材的9个质量标志物，分别为峰14、峰15、峰11、峰12、峰7（金丝桃苷）、峰16、峰8（异槲皮苷）、峰9和峰17。建立的HPLC指纹图谱方法稳定、简便，主成分分析（principal component analysis, PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis, OPLS-DA）预测的影响不同采收期水冬瓜叶药材的质量标志物可为水冬瓜叶药材质量控制提供参考。

HPLC fingerprint study and quality marker prediction analysis of the leaves of Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu in different collecting seasons
HAN Zhongyao, ZHANG Tao, SONG Yiyong, LU Yang, TIAN Hao, WANG Wanle, CAO Fang
Qiannan Medical College for Nationalities, Duyun 558000, China
Abstract: The fingerprints of 24 batches of the leaves of Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu in different collecting seasons were established by high performance liquid chromatography, and the quality markers of the leaves in different collecting seasons were predicted by the chemical pattern recognition method. This study provides a method and basis for quality control and quality marker prediction of the leaves in different collecting seasons. HPLC analysis was performed on a Agela Promosil C18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm). The mobile phase were consisted of 0.2% phosphoric acid solution (A) and acetonitrile (B) with gradient elution. The flow rate was 1.0 mL/min, the detection wavelength was 210 nm, the column temperature was 35 ℃  and the injection volumn was 10 μL. HPLC fingerprints of 24 batches of the in different collecting seasons were established. Despite the samples of Y19 and Y23, the similarity was 0.853~0.973. The 24 batches of the leaves in different collecting seasons were clustered into three groups by PCA. According to VIP > 1, nine quality markers affecting 24 batches of the leaves of Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu in different collecting seasons were predicted, which were peak 14, peak 15, peak 11, peak 12, peak 7 (hyperin), peak 16, peak 8 (isoquercitrin), peak 9 and peak 17, respectively. The established HPLC fingerprint method was stable and simple. The prediction of PCA and OPLS-DA could provide reference for the quality control of the leaves of Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu in different collecting seasons.
Keywords: the leaves of Toricellia Angulata Oliv.var.intermedia (Harms) Hu;fingerprint;high performance liquid chromatography;orthogonal partial least squares discriminant analysis
2022, 48(7):60-66  收稿日期: 2021-05-20;收到修改稿日期: 2021-07-24
基金项目: 贵州省科技计划项目基金（黔科合基础[2020]1Y390号）；贵州省卫生健康委员会技术基金（ gzwkj2021-453）；黔南民族医学高等专科学校科研基金项目（qnyz202034）
作者简介: 韩忠耀（1981-），男，河南上蔡县人，副教授，硕士，研究方向为中药、民族药质量控制
参考文献
[1] 贵州省药品监督管理局. 贵州省中药材、民族药材质量标准[M]. 1版. 贵阳: 贵州科技出版社, 2003: 107.
[2] 湖北省卫生局编. 湖北中草药志(二)[M]. 武汉: 湖北人民出版社, 1982: 677.
[3] 贵阳中医学院. 中华本草: 苗药卷[M]. 贵阳: 贵州科技出版社, 2005: 164.
[4] 韩忠耀, 宋伟, 李燕, 等. 黔产大接骨丹药材不同用药部位中紫丁香苷和总黄酮含量的经时变化特征分析[J]. 中国药房, 2020, 31(17): 2124-2128
[5] 张锦文, 郭洁茹, 唐菲, 等. 大接骨丹化学成分研究[J]. 中药材, 2010, 33(11): 1725-1727
[6] 王燕燕, 涂念, 张勇慧, 等. 大接骨丹化学成分研究(Ⅱ)[J]. 中草药, 2009, 40(10): 1551-1553
[7] 张锦文, 郭洁茹, 唐菲, 等. 大接骨丹的化学成分研究(Ⅲ)[J]. 中草药, 2011, 42(1): 15-17
[8] 吴少华, 马云保, 罗晓东, 等. 大接骨丹的化学成分[J]. 云南植物研究, 2000(2): 214-218
[9] 韩忠耀, 胡恩明, 邓先扩, 等. 基于HPLC-HESI-HRMS的水冬瓜根皮化学成分分析[J]. 食品工业科技, 2021, 42(17): 16-23
[10] 韩忠耀, 余跃生, 袁开伦, 等. 基于信息熵赋权法优化苗药水冬瓜根皮提取工艺[J]. 中药材, 2019, 42(2): 390-392
[11] 韩忠耀, 余跃生, 董海平, 等. 声光可调滤光器-近红外光谱法快速测定苗药水冬瓜根皮药材中总黄酮和浸出物的含量[J]. 理化检验-化学分册, 2019, 55(6): 668-671
[12] 涂念. 大接骨丹免疫调节活性成分研究[D]. 武汉: 华中科技大学, 2009.
[13] 贾于. 大接骨丹抗炎镇痛活性成分研究[D]. 武汉: 华中科技大学, 2008.
[14] 韩忠耀, 余跃生, 魏学军, 等. 苗药水冬瓜根皮药材高效液相色谱指纹图谱研究[J]. 中国医院药学杂志, 2017, 37(2): 126-129
[15] 韩忠耀, 张涛, 李燕, 等. 不同采收期大接骨丹HPLC指纹图谱建立及化学模式识别[J]. 中成药, 2021, 43(2): 244-248
[16] 陈华栋, 张锦文, 张勇慧. 大接骨丹干燥树皮抗炎镇痛活性有效部位筛选[J]. 海峡药学, 2012, 24(2): 29-30
[17] 韩忠耀, 曹芳, 江品良, 等. 基于HPLC指纹图谱和化学模式识别法评价不同采收期水冬瓜树皮药材质量[J]. 理化检验-化学分册, 2021, 57(1): 547-551
[18] 韩忠耀, 向军, 陈建宇, 等. 不同产地水冬瓜叶HPLC指纹图谱建立、化学模式识别分析及含量测定[J]. 中国药房, 2021, 32(10): 1224-1229
[19] 韩忠耀, 王传明, 宋伟, 等. 水冬瓜叶的生药学及其近红外快速鉴别技术研究[J]. 林产工业, 2021, 58(4): 59-63
[20] 沈颖昕, 张荣榕, 韩荣欣, 等. 玉红膏指纹图谱研究及质量标志物预测分析[J]. 中国医院药学杂志, 2021, 41(7): 675-680
[21] 许晓燕, 余梦瑶, 罗霞. HPLC分析灵芝指纹图谱及体外抗肿瘤活性的谱效关系[J]. 中国测试, 2020, 46(10): 23-27,36
[22] 张传维, 毕禄莎, 高泓, 等. 参芪复方浸膏UHPLC指纹图谱研究[J]. 中国测试, 2021, 47(1): 54-61