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基于UPLC-QTOF MS的鱼类鳃靶器官代谢组学分析方法研究

摘要:

针对鱼类鳃靶器官代谢组学研究缺乏准确高效的高通量检测技术的问题,建立了基于超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-QTOF MS)的分析方法。以图谱总峰面积、代谢物数目、相对峰面积的相对标准偏差(RSD)以及葡萄糖、L-亮氨酸、柠檬酸等6种代表性内源代谢物的响应值为指标,考察了不同实验条件对鳃组织中代谢物提取覆盖率、稳定性的影响。结果表明,采用加入样品-试剂比(mg∶μL)为1∶16的预冷甲醇-水(4∶1)低温研磨,并在-20℃下低温静置30 min后离心提取的方法时,鳃组织样本可获得最佳的提取效果。对数据采集过程中的色谱、质谱参数进行优化,进一步提高了代谢物的分离效果和信号强度,并利用质量控制(QC)样品进行了方法学考察。该方法具有较好的仪器精密度、方法精密度和样品稳定性,6种不同极性代表性代谢物的相对峰面积RSD均小于10%,可以满足鱼类鳃靶器官代谢组学研究的要求。研究结果为鱼类鳃靶器官的代谢组学研究提供了技术支撑。

关键词: 代谢组学;样品前处理;鱼类;鳃;超高效液相色谱-飞行时间质谱;

作者: 刘英杰1,2姚明珠1,2李姗蔚1,2陈中祥2王鹏2孙言春1,2

作者单位: 1. 上海海洋大学食品学院2. 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所

刊名: 《分析测试学报》

Journal: Journal of Instrumental Analysis

年,卷(期): 2022, (8)

在线出版日期: 2022年08月25日

页数: 7

页码: 1193-1199