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摘要：
建立了一种肿瘤细胞mRNA中12种正常核苷和修饰核苷的分析方法。肿瘤细胞样品经总RNA提取、mRNA纯化和mRNA水解后,加入8-溴鸟苷（8Br-G）为内标,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸甲醇溶液为流动相,采用Agilent RRHD SB-C18（2.1 mm×50 mm,1.8μm）色谱柱进行分离,电喷雾电离源正离子扫描（ESI+）,多反应监测（MRM）模式检测。该方法符合方法学验证要求,12种正常核苷和修饰核苷在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数（r）均大于0.99,定量下限（LOQ）为0.17～3.13 ng/mL,检出限（LOD）为0.08～1.56 ng/mL。将建立的方法应用于人鼻咽癌5-8F细胞系、人宫颈癌Hela细胞系和人胚肾上皮293T细胞系,成功地检测出多种修饰核苷水平。该方法细胞用量少（每样品2×106个）,分析时间短（每样品6 min）,灵敏度高,可为癌症研究和临床诊断等提供一种有效的分析方法。
关键词： 核苷; 修饰核苷; mRNA; 肿瘤细胞; 超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS);
作者： 罗阳旭，戴开金，杜娟，肖华弟，郑玲，陈训财，马安德，罗奇志，
作者单位： 南方医科大学公共卫生学院卫生检测中心；南方医科大学广东南方医大科技开发有限公司；南方医科大学司治鉴定中心；南方医科大学法医学院法医毒物学系；
刊名： 《分析测试学报》
Journal： Journal of Instrumental Analysis
年，卷(期)： 2020, (8)
在线出版日期： 2020年08月25日
页数： 11
页码： 950-960
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